Способ получения высококачественного препарата

(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 22.01.1998

(45) Опубликовано: 20.06.2000

(56) Список документов, цитированных в отчете опоиске: 1. SU 827068 A, 07.05.81. 2. SU 955932 A, 07.09.82. 3. SU 1090407 A, 07.05.84. 4. RU 2054943 C1, 27.02.96. 5. RU 2068267 C1, 27.10.96. 6. RU 2090207 C1, 20.09.97.

Адрес для переписки: 620086, г.Екатеринбург, ул. Тольятти 8, МУМП, Городской центр крови "САНГВИС"

(71) Заявитель(и): Муниципальное унитарное медицинское предприятие Городской центр крови "САНГВИС"

(72) Автор(ы): Нижечик Ю.С.,Пестова И.А.,Ананичева Л.Л.,Тарасова Т.Н.

(73) Патентообладатель(и):

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСОКОКАЧЕСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА "ЛИДАЗА"

(57) Реферат:

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к производству лекарственных препаратов. Технический результат: разработан промышленный способ получения высококачественного ферментативного препарата "Лидаза" для внутримышечных инъекций и электрофореза, не содержащего примесей. Сущность изобретения заключается в том, что экстракция семенников крупного рогатого скота проводится уксусной кислотой, затем экстракт очищается центрифугированием и ультрафильтрацией через мембраны с размером пор 50000 Да при рН 7,0 - 7,1, после чего проводится стерилизующая фильтрация и лиофильная сушка препарата при режиме, позволяющем сохранить лечебные свойства фермента. 1 табл.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к производству лекарственных препаратов.

Целью изобретения является разработка промышленного способа получения высококачественного ферментативного препарата "Лидаза" для внутримышечных инъекций и электрофореза, не содержащего посторонних примесей, пригодного для производства препарата в промышленных объемах. Во всех описанных в литературе и применяемых в промышленности способах для автолиза (экстрагирования) используется ацетон. Полученный таким способом препарат содержит органические примеси как от самого растворителя, так и примеси, которые ацетон извлекает из семенников.

Наиболее близким аналогом предлагаемого способа является способ получения препарата "Лидаза", описанный в [1] (А.с. 827068, A 61 K 37/48. Способ получения Лидазы, заявитель Ленинградское производственное объединение мясной промышленности). Измельченные семенники крупного рогатого скота экстрагируются уксусной кислотой, осаждаются и промываются охлажденным ацетоном, затем полученный продукт фильтруют и сушат. Таким образом, этот способ также не лишен недостатков, описанных выше. Кроме того, этот способ не позволяет наладить производство качественного препарата в промышленных объемах.

Сущность предлагаемого нами способа заключается в следующем. Для экстракции фермента используется уксусная кислота при pH 4,1 - 4,4. Экстрагирование проводится в течение 19 - 20 часов, что позволяет получить препарат "Лидаза", полностью соответствующий требованиям фарм.статьи 42-2606-93 по содержанию белка и гиалуронидазной активности. Центрифугированием отделяется осадок от надосадочной жидкости на центрифугах PC-6. Центрифугат концентрируют и очищают ультрафильтрацией через мембраны с размером пор 50000 Да. Стерилизующая фильтрация проводится через мембраны 0,22 мкм, что позволяет максимально очистить продукт, а тщательно подобранный режим лиофильной сушки, который проводится на промышленных аппаратах типа LZ - 45/27, позволяет сохранить лечебные свойства фермента. Препарат разливают в 5 мл - ампулы и в кассетах помещают в сублиматор лиофильной установки и проводят замораживание препарата при температуре не выше -40oC в течение 12 часов непосредственно в сублиматоре аппарата LZ - 45.27. Замораживание препарата непосредственно в сублиматоре и исключение предварительного замораживания препарата в низкотемпературных прилавках позволяет получить более качественный конечный препарат. Началом процесса лиофильной сушки считается момент включения вакуумного насоса. Остаточное давление в камере не должно превышать 10 Па. Через 3 часа процесс "сорбции" интенсифицируют подогревом полок сублиматора. Температуру подогрева полок регулируют таким образом, чтобы температура замороженного препарата не превышала -20oC в течение 10 - 16 часов. Затем постепенно повышают температуру от минусовой до плюсовой и переходят на стадию теплового досушивания ("десорбции") в течение 10 - 14 часов. На конечном этапе сушки температура "Лидазы" не должна превышать +25oC.

В таблице приведена статистика по препарату "Лидаза", полученная при проверке в Государственном научно-исследовательском институте по стандартизации и контролю лекарственных средств. Проверка препарата производилась в двух лабораториях: в лаборатории органопрепаратов и в лаборатории биохимии лекарственных средств. Таким образом, предлагаемый способ обеспечивает получение высококачественного ферментативного препарата "Лидаза" для внутримышечных инъекций и электрофореза с активностью от 64 до 128 у.е. с гарантированным сроком сохранения гиалуронизадной активности в течение 2-х лет и содержанием белка не менее 10 мг/мл, что соответствует требованиям фарм. статьи 42- 2606-93.

Литература

Способ получения препарата "Лидаза" путем измельчения семенников крупного рогатого скота, заключающийся в том, что проводят экстракцию уксусной кислотой при рН 4,1 - 4,4 в течение 19 - 20 ч, затем проводят центрифугирование, полученный центрифугат концентрируют и проводят ультрафильтрацию через мембраны с размером пор 50000 Да при рН 7,0 - 7,1 при разбавлении 0,9%-ным раствором хлорида натрия, стерилизующую фильтрацию осуществляют на мембранах с диаметром пор 0,22 мкм, затем препарат разливают в ампулы и в кассетах помещают в сублиматор лиофильной установки и проводят замораживание препарата при температуре не выше -40o непосредственно в сублиматоре в течение 12 ч, температуру подогрева полок регулируют таким образом, чтобы температура замороженного продукта не превышала -20o в течение 10 - 16 ч, затем постепенно повышают температуру от минусовой до плюсовой и переходят на стадию теплового досушивания в течение 10 - 14 ч.

РИСУНКИ

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 23.01.2003

Номер и год публикации бюллетеня: 14-2004

Извещение опубликовано: 20.05.2004